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發布時間:2023-02-16 16:18:40 作者:知網小編 來源:www.ld2008.cn
實驗一:蛋白質含量測定方法的研究---非蛋白物質的可能干擾及其干擾程度的研究分析 摘要:本次實驗通過分別利用三種方法(Folin-酚法,考馬斯亮藍(G-250),紫外法)平行測定純蛋白溶 液和生物材料中蛋白的含量,分別計算和比較每種材料通過三種方法測定結果的差異性。 再利用同時進行 的11組實驗的數據進行整合分析。
比色法蛋白濃度測定蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。 有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。 雙縮脲(NH3CONHCONH3)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產物。
Bradford方法能夠利用96孔板檢測體積低至5 μL的蛋白質濃度,然而很多plate reader不具備595 nm的濾光片。 這里要說明的是,蛋白質與染料產生的藍色復合物可以利用570-610 nm之間的任何波長檢測到。