知網(wǎng)查重怎么查?新手幫助CNKI知網(wǎng)查重檢測(cè)系統(tǒng)入口:國(guó)知網(wǎng)論文查重系統(tǒng)后該系統(tǒng)首先會(huì)對(duì)論文的格式進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別,根據(jù)格式自動(dòng)識(shí)別進(jìn)行論文查重范圍的規(guī)定
發(fā)布時(shí)間:2022-06-21 01:00:15 作者:知網(wǎng)小編 來(lái)源:www.ld2008.cn
一、流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理 Annexin V和PI雙染法是流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡的經(jīng)典方法 ,它是基于凋亡的早期細(xì)胞膜上的 磷脂酰絲氨酸 (phosphotidylserine, PS)從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面這一原理來(lái)實(shí)現(xiàn)的(如下圖3)。 圖3:凋亡早期 PS從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)外翻
流式細(xì)胞儀: 現(xiàn)在市面上有多種型號(hào)的流式細(xì)胞儀,但其基本結(jié)構(gòu)都是相同的,分析性流式細(xì)胞儀有 液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng)、監(jiān)測(cè)分析系統(tǒng) 。 光路系統(tǒng)始于激光器,其分類分法很多,最常用的分類方法是根據(jù)其發(fā)射的激光的波長(zhǎng)來(lái)分,如常見(jiàn)的有488nm的藍(lán)激光器、635nm的紅激光器和405nm的紫激光器,不同的激光器發(fā)出的激光照射到細(xì)胞后產(chǎn)生的光信號(hào)會(huì)經(jīng)過(guò)不同的光路系統(tǒng)被不同的通道接收。 流式細(xì)胞儀采集的光信號(hào)包括散射光信號(hào)和熒光信號(hào),散射光信號(hào)也就是我們常說(shuō)的FSC(前向散射光,反應(yīng)細(xì)胞的大小)、SSC(側(cè)向散射光,反應(yīng)細(xì)胞的復(fù)雜程度);熒光信號(hào)是細(xì)胞上結(jié)合有熒光素,被激光激發(fā)以后,會(huì)發(fā)射熒光信號(hào)。
流式細(xì)胞儀的檢測(cè)分析系統(tǒng)就是以通道為單位將細(xì)胞的各個(gè)通道的光信號(hào)匯總分析,最后得出樣品群體中細(xì)胞的物理化學(xué)特征。 通道,我們可以理解為就是光電倍增管,有2個(gè)作用,①將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娮有盘?hào);②放大電子信號(hào)。
TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測(cè)定,并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。 Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,它在凋亡信號(hào)傳導(dǎo)的許多途徑中發(fā)揮功能。 Caspase-3正常以酶原 (32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個(gè)大亞基 (17KD)和兩個(gè)小亞基 (12KD)組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。